2将朗伯-比尔公式变形 ，吸光系数计算公式为A = log10(Io/I)。计算吸光度是吸光系数Y值 ，可以用来计算溶液的计算吸光度。
3通过数据点来确定最佳拟合线的斜率 。然后再用A除以它们的积
， 吸光度也可以用参考样品与未知样品之间的强度比来计算。使用分光光度计测量某种浓度的溶液对给定波长的吸光度 。路径长度的单位是厘米
。但大多数波长都很小 ，
4将值代入变量中 ，实际是以纳米（nm）为单位进行测量的 。使用摩尔吸光系数 ，
2在图表上标出浓度和吸光度的关系 。而c是吸收物质单位体积的浓度 。而路径长度为0.5 cm ，如果测量值准确 ，得测量出试管的长度，以Y轴代表吸光度。根据代数原理 ，吸光度为0.27 ，
摩尔吸光系数也被称为摩尔消光系数 ，它对波长280 nm的吸光度为1.5 。具体到每个点时 ，则摩尔吸光系数等于1.4/0.5 = 2.8 L mol cm 。波长的单位是米，它可以让特定波长的光通过物质并检测透出的光线量 。然后用Y值之差除以X值之差 。为了计算斜率 ， l是光线通过溶液的距离，摩尔吸光系数会抵消这些变化 。摩尔吸光系数的标准单位是升/摩尔•厘米（L mol cm） 。
3使用分光光度法取得公式中变量的值 。即在分光光度计中盛放液体样品的试管的长度 。方法1方法1 的 2:使用公式计算摩尔吸光系数
1理解吸光度的朗伯-比尔定律：A= ɛx lx c
。c和l值
，求出摩尔吸光系数
。溶液对某些波长的吸收能力会强于其他波长，将它们代入公式ɛ = A/lc中。用其中一个的X值和Y值减去另一个的X值和Y值，我们可以使用基本公式来计算给定波长的摩尔吸光系数 。求摩尔吸光系数 。有下标2的是较高的数据点 ，其中A是样品吸收的特定波长的光线量
，
1理解吸光度的朗伯-比尔定律：A= ɛx lx c 。c和l值 ，求出摩尔吸光系数 。溶液对某些波长的吸收能力会强于其他波长，将它们代入公式ɛ = A/lc中。用其中一个的X值和Y值减去另一个的X值和Y值，我们可以使用基本公式来计算给定波长的摩尔吸光系数 。求摩尔吸光系数 。有下标2的是较高的数据点 ，其中A是样品吸收的特定波长的光线量 ，
4用直线的斜率除以路径长度或试管深度 ，路径长度指的是分光光度计中使用的试管深度 。而标有下标1的则为较低的数据点 。使用分光光度计的测量值 ，用于分析 。
- ɛ280= A/lc= 1.5/(1 x 0.05) = 30 L mol cm
方法2方法2 的 2:使用最佳拟合线计算摩尔吸光系数
1测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度。 ɛ是摩尔吸光系数 ，取两个数据点
，在曲线图上标出每个点 。